CHOK1-mouse-CD70基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株產(chǎn)品背景介紹

1. 研究方向

CHOK1-mouse-CD70基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株主要用于研究CD70分子在免疫調(diào)節(jié)、腫瘤免疫治療及細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中的作用。CD70是腫瘤壞死因子（TNF）超家族成員，與其受體CD27結(jié)合后，可激活T細(xì)胞和B細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。該穩(wěn)轉(zhuǎn)株廣泛應(yīng)用于：

腫瘤免疫治療：研究CD70在腫瘤微環(huán)境中的作用及其作為免疫治療靶點(diǎn)的潛力。

免疫調(diào)節(jié)：探討CD70-CD27信號(hào)通路在免疫細(xì)胞激活、增殖和分化中的機(jī)制。

藥物篩選：用于篩選靶向CD70的藥物或抗體。

2. 操作步驟

細(xì)胞復(fù)蘇：

從液氮中取出凍存的CHOK1-mouse-CD70穩(wěn)轉(zhuǎn)株，迅速解凍。

將細(xì)胞懸液加入預(yù)熱的培養(yǎng)基中，離心后重懸并接種于培養(yǎng)瓶。

細(xì)胞培養(yǎng)：

使用DMEM/F12培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素。

在37°C、5% CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，定期傳代。

基因表達(dá)驗(yàn)證：

通過qPCR或Western Blot檢測(cè)CD70基因的表達(dá)水平。

功能實(shí)驗(yàn)：

進(jìn)行共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，分析CD70對(duì)免疫細(xì)胞的影響，或用于藥物篩選。

3. 注意事項(xiàng)

無菌操作：避免細(xì)胞污染。

培養(yǎng)基更換：每2-3天更換一次，保持細(xì)胞良好狀態(tài)。

凍存細(xì)胞：使用凍存液（如90% FBS + 10% DMSO），并逐步降溫凍存。

基因表達(dá)穩(wěn)定性：定期檢測(cè)CD70表達(dá)，防止基因沉默或表達(dá)下降。

4. 文獻(xiàn)參考

CD70在腫瘤免疫中的作用：

Jensen, S. M., et al. (2018). "CD70 as a target for cancer immunotherapy." Cancer Immunology Research, 6(6), 669-677.

CD70-CD27信號(hào)通路：

Nolte, M. A., et al. (2009). "Timing and tuning of CD27-CD70 interactions: the impact of signal strength in setting the balance between adaptive responses and immunopathology." Immunological Reviews, 229(1), 216-231.

5. 細(xì)胞背景資料

CHOK1細(xì)胞：中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞系，常用于重組蛋白生產(chǎn)和基因表達(dá)研究。

CD70基因：編碼CD70蛋白，屬于TNF超家族，主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞，參與免疫調(diào)節(jié)。

總結(jié)

CHOK1-mouse-CD70基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株是研究CD70功能的重要工具，廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)和腫瘤學(xué)領(lǐng)域。通過該穩(wěn)轉(zhuǎn)株，研究人員可以深入探討CD70在免疫調(diào)節(jié)和腫瘤治療中的作用，并開發(fā)相關(guān)治療策略。