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當前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  試劑盒  >  檢測試劑盒  >  TE04114-輔酶(4CL)檢測試劑盒(香豆酸微板法)

4-輔酶(4CL)檢測試劑盒(香豆酸微板法)

簡要描述:4-輔酶(4CL)檢測試劑盒(香豆酸微板法),雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:TE0411
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-11-01
  • 訪  問  量:361

詳細介紹

4-香豆酸輔酶連接酶是催化桂皮酸形成咖啡、香豆酸的酶,該酶多存在于高等植物、酵母、菌類可溶性部分物質(zhì),

屬于細胞木質(zhì)素合成途徑中間的關(guān)鍵酶,研究該酶可以探討多種生物細胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機理,為減少水果石細胞

含量提高其品質(zhì)提供依據(jù)。


4-輔酶(4CL)檢測試劑盒(香豆酸微板法)檢測原理是以香豆酸作為底物,在酶促反應(yīng)的最適條件下采用每

隔一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,于酶標儀333nm處測定吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,主要用于植物組織的裂

解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的4-香豆酸輔酶連接酶活性,尤其適用于測定水果中4-香豆酸輔酶連接酶活性。該試劑

盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考)

自備材料:

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板


操作步驟(僅供參考):

1、準備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。

③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進行恰當?shù)南♂尅?/span>

2、PAL加樣∶

取96孔板,按照下表設(shè)置對照孔、測定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并

注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置2平行孔,

求平均值。

加入物(μl)對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調(diào)零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

液終止反應(yīng)(備選方案),以對照孔為對照調(diào)零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應(yīng)為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調(diào)零,酶標儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度。

注意事項∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液,應(yīng)盡快檢測,亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應(yīng)注意比色杯的最小檢測體積。

4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。




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